食用菌生產中的滅菌和消毒是有本質區別的,滅菌是殺死雜菌及其芽孢的過程,消毒是殺死食用菌表面部分病原微生物的過程。本文介紹一下食用菌母種培養基的滅菌方法與步驟,供參考。
一、食用菌母種培養基的滅菌方法
在食用菌母種培養基制作中常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法,它是最常用而且滅菌最徹底的一種方法。具體方法步驟及注意事項如下:
1、選鍋、加水
選用手提式高壓蒸汽滅菌鍋,向滅菌鍋內加水至水位標記高度。注意:水不可過多也不可過少,過少易燒干:過多棉塞易受潮,引起雜菌污染。
2、裝入培養基
把培養基有序豎直排放人滅菌鍋內,留開通氣孔,并保證蒸汽流通。試管口和棉塞不能直接接觸鍋壁,上面要蓋2層報紙或1層防水油紙,防止鍋蓋下面的冷凝水打濕棉塞。
最后均勻擰緊鍋蓋上的螺絲,勿使漏氣。
3、加熱滅菌
將裝入培養基的滅菌鍋放置在2-3千瓦的電爐上進行加熱,當壓力升至0.05兆帕時,打開放氣閥緩慢放氣,讓壓力降至零,再放氣10-15分鐘,當有大量熱蒸汽排出時,關閉放氣閥升壓滅菌。
當壓力升至0.11-0.12兆帕時,開始計時,并調節火力大小,始終維持所需壓力30分鐘。
4、停止加熱,緩慢減壓
在0.11-0.12兆帕壓力下.滅菌30分鐘后,停止加溫,待壓力自然下降到0時打開放氣閥,緩慢排出殘留蒸汽;然后打開鍋蓋,待熱蒸汽冷卻片刻后,取出滅菌物品。
滅菌完后,若連續使用,應注意補足水分后再用。若暫時不用,應排出鍋內剩余水分,清理干凈,下次備用。
二、食用菌接種場所的消毒方法
首先將接種箱、接種室或者接種帳的衛生打掃干凈;然后放人所有用具及母種培養基,用甲醛和高錳酸鉀熏蒸消毒。藥品用量為每立方米甲醛10毫升,高錳酸鉀5克。
熏蒸后的接種箱、接種室或者接種帳還可用紫外線輔助殺菌,一般10立方米的空間,用30瓦的紫外線燈照射30分鐘,待臭氧散去,即可開始接種。
若采用超凈工作臺接種,首先要將超凈工作臺用清潔的水和干凈的抹布擦洗干凈,然后再用75%的酒精擦拭,放人接種用具和母種培養基,開機吹無菌風30分鐘。
三、食用菌菌種消毒后的培養
通過加溫、通風、灑水、遮光等方法,保持培養室(箱)溫度20℃-24℃;空氣相對濕度在60%左右;暗光;空氣新鮮,促使菌絲健壯生長。經2-3天,即可在接種塊上萌發出大量菌絲,經7-10天即可長滿培養基斜面。
在培養期間每隔2-3天檢查一次菌絲生長情況,若發現有雜菌污染或生長不正常的試管,立即挑出并淘汰。
長滿的菌種可用于進一步擴繁,若暫時不用可放置在20℃-40℃的冰箱中冷藏備用。