接種前勿忘嚴格檢查菌種質量。如有黃、綠、黑色出現，說明菌種已被雜菌污染，應淘汰；如菌絲出現棕紅色斑塊或液體，可能菌絲老化或局部傷熱；如菌絲灰白、稀疏無力，說明菌種活力低下，應慎用。

接種時在酒精燈火焰上方無菌區打開菌種瓶，刮除表層老化的菌絲和已形成瘤狀或珊瑚狀子實體。打開被接菌袋口，用接種工具將菌種迅速接入袋口內，然后封口。每瓶二級菌種可接種30～45袋三級種。

四、猴頭菇菌種培養方法

養菌室要求干燥、潔凈 、保溫、有通風條件，室內可搭5~8層架子，每層高度在35~45 cm，最下層距離地面不得少于40 cm，床面可取任何材料，但表面一定要堅固、平整、光滑，避免刺破袋底部。養菌室在養菌前3 d應做消毒處理，滅菌方式與接種室消毒要求基本相同。

接種完畢的菌袋進入培養室后，在發菌管理過程中要對菌袋進行檢查。菌袋入培養室后3～4 d，一般不宜翻動。7 d后檢查菌絲生長情況和有沒有雜菌污染。一旦發現雜菌污染菌袋立即清除，焚燒或深埋處理以防傳染。

在適宜條件下，25 d左右菌絲即可長滿袋。為了使其順利完成發菌，應加強管理：

一是溫度控制上主要以控制室溫為主，溫度計應放到菌袋溫度最高的地方。菌袋初入培養室的1～4 d，室溫應調到24～26 ℃，以使所接菌種在最適環境中盡快吃料，定植生長，形成優勢，減少雜菌污染。

5 d起，隨著菌絲生長，袋內溫度上升，比室溫高出2 ℃左右，為此應將室溫調至24 ℃以下。16 d之后菌絲逐步進入新陳代謝旺盛期，應控制在20～23 ℃為適。

二是濕度控制方面，在發菌期，菌絲是依靠基內水分生長，不需要外界供水，因此室內空氣相對濕度在60%左右即可。濕度大時，應開窗通風。因濕度太大，會導致雜菌滋生。

三是光線控制方面，發菌期菌棚應盡量黑暗，以避免早出菌現象。