人工授精就是用人為的方法采集公畜的精液，經過檢查和處理后，利用器械再輸入到母畜的生殖道內，使精子與卵子相結合，達到使母畜受孕的目的。下面主要介紹目前廣泛應用的直腸把握式母牛人工授精的操作過程及注意事項。
1. 確定配種時間
對發情母牛適時配種，可以提高受胎率，因此要確定排卵時間和配種適宜時間。決定母牛配種時間的因素有排卵時間、卵子保持受精能力的時間及精子在母牛生殖道內保持受精能力的時間。母牛一般在發情結束后5～15小時排卵，在排卵后6～12小時保持受精能力，精子在母牛生殖道內保持受精能力的時間為24～48小時。
確定配種時間比較準確的方法是直腸檢查法，但是大多數情況下依靠詢問畜主母牛發情時間、觀察母牛外陰部變化來確定最適宜的輸精時間。輸精人員向畜主詢問受配母牛年齡、胎次、發情等情況，仔細觀察母牛表現：母牛神態轉向安定，發情表現開始減弱，外陰部腫脹開始消失，子宮頸稍有收縮，黏膜由潮紅變為粉紅，直檢時卵泡皮變溥，有彈力，卵泡液明顯波動時，可輸精。
2. 解凍
將細管凍精從液氮罐中迅速取出,把封閉的一端置于38~39度的水杯中,水浴解凍10秒后取出，拭去水珠待用。
3. 鏡檢
先將顯微鏡置于操作臺或桌面上,對載玻片消毒后放到顯微鏡上,調好光。將解凍好的細管封閉的一端剪去,剪口捏圓,擠一滴于載玻片上鏡檢精子活力。冷凍精子的活力不得低于0.3。
4. 裝槍
將解凍的細管凍精裝入輸精槍,套上塑料外套管。輸精人員帶上長臂手套。
5. 消毒
將接受輸精的母牛固定在六柱欄內保定好，尾巴固定于一側，用0.1%的高錳酸鉀溶液對外陰部徹底消毒,用衛生紙拭干外陰部。
